Una fosfotransferasa añade un grupo fosfato a un azúcar de seis carbonos, más notablemente la glucosa (para producir glucosa-6-fosfato) o la fructosa (para producir fructosa-6-fosfato). A diferencia de la glucokinasa, esta enzima fosforila la glucosa independientemente de los niveles de insulina o glucosa y está inhibida por la glucosa-6-fosfato.